Soutenance de thèse de Amira GABSI

La sclérodermie systémique (ScS) est une maladie auto-immune caractérisée par des lésions vasculaires, une fibrose excessive de la peau et des organes internes et un dysfonctionnement immunitaire. Deux sous-groupes cliniques de cette maladie,les formes cutanées limitées (lcScS) et cutanées diffuses (dcScS). La fibrose pulmonaire et l'hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) sont les complications les plus graves et constituent actuellement les principales causes de décès. Le CD146, a été récemment décrit comme nouvelle cible, est une glycoprotéine membranaire appartenant à la superfamille des Immunoglobulines, est distribué de manière omniprésente sur l'endothélium. Il est localisé à la jonction endothéliale et assure plusieurs rôles tels que l'adhésion cellulaire, l'inflammation, l'angiogenèse et le processus tumoral en plus de différentes voies de signalisation.En partant du clivage par protéolyse de la forme membranaire, une forme soluble de la molécule (sCD146) a été décrite dans le sang circulant chez des patients atteints de ScS, nous avons montré que les taux de sCD146 étaient augmentés par rapport aux contrôles et que la fibrose était plus fréquente chez les patients atteints de ScS présentant des taux «faibles» de sCD146. Dans un modèle de SCS chez les souris, les souris dépourvues de CD146 étaient très susceptibles de développer une fibrose cutanée, et une fibrose cutanée pouvait être prévenue par l'injection de sCD146.L'expression de CD146 n'est pas limitée à l'endothélium; il est exprimé sur d'autres types de cellules telles que les cellules de mélanome extra-villeuses trophoblastiques [13] et les cellules TH17. TH17 contribue à la pathogenèse de multiples maladies auto-immunes, y compris de ScS et le pourcentage de cellules TH17 était significativement augmenté chez les patients ScS par rapport aux témoins sains. La contribution de ces cellules à la maladie est médiée par IL17. L'IL-17A est une cytokine produite principalement par Th17 et agit principalement sur les cellules non hématopoïétiques, en particulier les cellules épithéliales, et participe systématiquement à une immunité protectrice au niveau des tissus frontières. L'IL-17 se lie principalement à l'IL-17RA et initie un signal pro-inflammatoire fortement impliqué dans la progression de nombreuses maladies auto-immunes chez l'homme. Dans la sclérodermie systémique, l'expression de l'IL-17A dans l'ARNm et les protéines était positivement corrélée à la peau de Rodnan modifiée. Le CD146 est impliqué dans l'activation de TH17 et la production d'IL17 qui est liée au développement de ScS . Notre étude sérologique et cellulaire a 63 patients traités pour ScS dans le département de médecine interne de l'hôpital de La Rabta Tunis. Nous avons mesuré les taux de sCD146 et d'autoanticorps dans le sérum de 50 patients tunisiens atteints de ScS.Les taux de sCD146 et le taux d'auto-anticorps étaient significativement plus élevés chez les patients ScS par rapport à 50 témoins en bonne santé. D’un autre coté Nous avons d'abord étudié l'expression de l'ARNm de RORδT chez 50 patients atteints de PBMC; facteurs de transcription des cellules TH17 utilisant la qPCR. Nous avons montré une augmentation de l'expression de l'ARNm de RORδT chez 50 patients atteints de ScS par rapport à 50 témoins sains. Nous avons ensuite étudié le pourcentage de CD4 + IL17RA + à l'aide d'une analyse par cytométrie en flux. Nous avons trouvé un pourcentage plus élevé de CD4 + IL17RA + chez 20 patients atteints de ScS par rapport à 20 témoins sains. En parallèle, nous avons évalué la population de cellules T régulatrices définie comme CD4 + CD127 + FOXP3 +. Aucune augmentation significative n'a été observée dans ce sous-ensemble. D'après nos résultats, nous pouvons proposer CD146 / sCD146 en tant que biomarqueur dans ScS pour l'évaluation de l'activité de la maladie et la balance TH17 / sCD146 en tant qu'axe de diagnostic novateur pour ScS.

Systemic sclerosis (SSc) is an autoimmune disease characterized by vascular lesions, excessive fibrosis of the skin and internal organs, and immune dysfunction. Two clinical subgroups of this disease, namely limited cutaneous (lccS) and diffuse cutaneous (dcScS), have been described according to the extent of cutaneous fibrosis [1]. Pulmonary fibrosis and pulmonary arterial hypertension (PAH) are the most serious complications and currently constitute the leading causes of death. The study of new molecular targets is essential. CD146, has recently been described as a new target, is a membrane glycoprotein belonging to the immunoglobulin superfamily [5], is omnipresently distributed on the endothelium [6; 7]. It is localized at the endothelial junction [7] and performs several roles such as cell adhesion [8], inflammation [9], angiogenesis and the tumor process in addition to different signaling pathways [8]. Starting from proteolytic cleavage of the membrane form, a soluble form of the molecule (sCD146) has been described in circulating blood [9-10-11] in patients with SSc, we have shown that sCD146 levels are increased compared with controls and that fibrosis was more common in patients with SSc with "low" levels of sCD146. In a SCS model in mice, mice lacking CD146 were very likely to develop cutaneous fibrosis, and cutaneous fibrosis could be prevented by injection of sCD146 [4]. The expression of CD146 is not limited. endothelium; it is expressed on other types of cells such as trophoblastic extra-villous melanoma cells [13] [13] and TH17 cells. [14] TH17 contributes to the pathogenesis of multiple autoimmune diseases, including SCS, and the percentage of TH17 cells was significantly increased in SCS patients compared with healthy controls [15]. The contribution of these cells to the disease is mediated by IL17. IL-17A is a cytokine produced primarily by Th17 and acts primarily on non-hematopoietic cells, particularly epithelial cells, and systematically participates in protective immunity in border tissues. [16] IL-17 binds mainly to IL-17RA [17] and initiates a pro-inflammatory signal strongly implicated in the progression of many autoimmune diseases in humans [18, 19]. In systemic scleroderma, the expression of IL-17A in mRNA and proteins was positively correlated with the modified Rodnan skin. CD146 is involved in the activation of TH17 [20] and the production of IL17 which is related to the development of ScS [21]. Our serological and cellular study has 63 patients treated for SSc in the Department of Internal Medicine of La Rabta Tunis Hospital. We measured the levels of sCD146 and autoantibodies in the serum of 50 Tunisian patients with SSc. SCD146 levels and autoantibody levels were significantly higher in SCS patients compared to 50 healthy controls. . On the other hand, we first studied the expression of RORδT mRNA in 50 patients with PBMC; transcription factors of TH17 cells using qPCR. We showed an increase in the expression of RORδT mRNA in 50 patients with SSc compared to 50 healthy controls. We then studied the percentage of CD4 + IL17RA + using flow cytometry analysis. We found a higher percentage of CD4 + IL17RA + in 20 patients with SSc compared to 20 healthy controls. In parallel, we evaluated the regulatory T cell population defined as CD4 + CD127 + FOXP3 +. No significant increase was observed in this subset. Based on our results, we can propose CD146 / sCD146 as a biomarker in ScS for the evaluation of disease activity and the TH17 / sCD146 balance as an innovative diagnostic axis for ScS. We plan to further investigate the role of CD146 / sCD146 in the fibrotic process and to investigate the relationship between the production of sCD146 and IL17A by TH17 cells in order to evaluate the potential interest of the molecule for therapeutic applications. However, a large population, a skin biopsy from different locations, and an association with treatment should be taken to confirm these results.