Ecole Doctorale

Sciences de la Vie et de la Santé

Spécialité

Biologie-Santé - Spécialité Maladies Infectieuses

Etablissement

Aix-Marseille Université

Mots Clés

Termites champignonnistes,microbiotes,Impact,

Keywords

Fungus-farming termite,microbiota,impact,

Titre de thèse

Termites champignonnistes, leur microbiote et leur impact
Fungus-farming termite, their microbiota and their impact

Date

Vendredi 12 Avril 2024 à 14:00

Adresse

Bâtiment IHU Méditerranée Infection – Site TIMONE 19-21 bd Jean MOULIN 13005 MARSEILLE Salle 08

Jury

Directeur de these M. Oleg MEDIANNIKOV IRD, Aix-Marseille Université
CoDirecteur de these Mme Florence FENOLLAR IHU, Aix-Marseille Université
Examinateur Mme Dorothée MISSE IRD, Université de Montpellier
Président Mme Laurence CAMOIN Aix-Marseille Université
Rapporteur M. Pierre MARTY CHU de Nice
Rapporteur M. Julien POMPON IRD, Université Montpellier

Résumé de la thèse

Les termites sont des insectes eusociaux principalement abondants en Afrique. Ils sont aussi d’importants ingénieurs de l'écosystème. Ces insectes extraordinaires fascinent depuis longtemps les biologistes et les chercheurs en raison de leur mode de vie social unique, de leur polyphénisme de caste, de leurs symbioses et de leur écologie. Ils ont historiquement servi de ressources naturelles précieuse dans divers domaines, notamment dans la médecine traditionnelle, mais aussi comme ressources alimentaires chez l’homme et chez les animaux sauvages et d’élevage. Il est important de constater que les termites supérieurs (termites champignonnistes) entretiennent une relation symbiotique obligatoire et remarquable avec les champignons du genre Termitomyces établie depuis des millions d'années. Les nodules de ce champignon cultivé par les termites dans les meules fongiques de la termitière, constituent une source de nourriture pour les membres de la colonie. Selon des études ethnographiques et scientifiques, les meules fongiques présenteraient aussi des propriétés antimicrobiennes. Le microbiote des termites joue un rôle capital dans leur physiologie et leur comportement. Les tréponèmes du tractus intestinal des termites ont notamment un rôle principal dans la digestion de lignocellulose. Cependant, actuellement, les données sur les spirochètes du genre Treponema restent encore très rares, leur culture in vitro étant fastidieuse. Dans a première partie de notre thèse, une revue intitulée “Les termites : ravageurs, ingénieurs ou bienfaiteurs ?” donne un aperçu détaillé sur l’importance des termites et de leur environnement, termitières et produits dérivés tels que les champignons Termitomyces à travers différents endroits du monde, et ce malgré parfois le rôle de ravageur de ces termites. Dans la deuxième partie, nous avons évalué in vitro les propriétés antimicrobiennes des extraits bruts de meules fongiques provenant de monticules de termites du Sénégal sur une série de micro-organismes d'origine clinique, y compris des bactéries multirésistantes. Nous avons procédé à un examen approfondi de 11 meules fongiques provenant de cinq espèces de termites et nous avons découvert des propriétés antibiotiques remarquables des extraits bruts des meules fongiques. Nous avons identifié, en particulier, le méglutol comme un composant important dans les fractions actives de plusieurs meules, notamment ceux collectés dans les champs agricoles. La non-détection de ce méglutol dans d’autres meules fongiques pourrait être liée à la présence de molécules bioactives non encore détectées dans les meules fongiques, contribuant ainsi ‡ leur pouvoir antimicrobien. Dans la troisième partie de notre thèse, au Sénégal, nous avons étudié la présence de tréponèmes de la famille des Breznakiellaceae dans diverses espèces de termites en utilisant des méthodes moléculaires et de microscopie électronique modernes. Parmi les 62 colonies de termites étudiées, 82,2% des échantillons portaient de l'ADN de tréponèmes. Nous avons ensuite caractérisé ces tréponèmes identifiés par amplification du gène 23S de l’ARNr à l'aide d'une PCR standard spécifique aux Treponemataceae et aux Breznakiellaceae. Les séquences obtenues ont montré une similarité avec des tréponèmes connus. Afin de confirmer la présence des tréponèmes identifiés moléculairement, nous avons également utilisé la microscopie électronique (Hitachi TM4000), une autre technique innovante pour confirmer et détecter la présence de Treponema chez Trinervitermes geminatus. Nos travaux nous ont donc permis d’une part de confirmer la présence de molécules bioactives dont le méglutol dans les meules fongiques. D’autre part, en utilisant une approche moléculaire et de microscopie électronique, nous avons montré que la diversité phylogénétique des tréponèmes intestinaux des termites est plus importante que prévu.

Thesis resume

Termites, primarily abundant in Africa, are eusocial insects that play a crucial role as ecosystem engineers. These extraordinary insects have long fascinated biologists and researchers due to their unique social lifestyles, caste polyphenism, symbioses, and ecology. Historically, they have served as valuable natural resources in various fields, including traditional medicine, human dietary practices, and livestock nutrition. Notably, higher termites, also known as "fungus-farming termites," maintain a mandatory and remarkable obligate symbiotic relationship with fungi of the genus Termitomyces, established over millions of years. Nodules of this fungus, cultivated by termites in fungal combs within the termite nest, serve as a food source for colony members. Recent studies have indicated antimicrobial properties in these fungal mounds, as revealed through ethnographic and scientific investigations. The termite microbiota also plays a crucial role in their physiology and behavior. Treponemes in the intestinal tract of termites have been found to play a significant role in lignocellulose digestion. Currently, data on Treponema spirochetes remain scarce, and in vitro culture remains a challenging task. In the first part of our thesis, a review titled "Termites: Pests, Engineers, or Benefactors?" provides a detailed overview of the importance of termites, their environment, mounds, and derivatives such as Termitomyces fungi across different global locations, despite their occasional pest role. In the second part, we conducted in vitro evaluations of the antimicrobial properties of crude fungal extracts from termite mounds in Senegal against a series of clinically relevant microorganisms, including multidrug-resistant bacteria. An in-depth examination of 11 fungal mounds from five termite species revealed remarkable antibiotic properties in the crude extracts. Particularly, meglutol was identified as a significant component in the active fractions of several mounds, especially those collected in agricultural fields. The non- detection of meglutol in other fungal mounds could be linked to the presence of as-yet-undetected bioactive molecules contributing to their antimicrobial potency. In the third part of our thesis, we investigated the presence of treponemes from the Breznakiellaceae family in various termite species using advanced molecular and electron microscopy methods. Among the 62 termite colonies studied, 82.2% of the samples carried Treponema DNA. We characterized these treponemes by amplifying the 23S rRNA gene using standard PCR specific to Treponemataceae and Breznakiellaceae. The obtained sequences showed similarity to known treponemes. To confirm the presence of molecularly identified treponemes, we also utilized electron microscopy (Hitachi TM4000), an innovative technique, to confirm and detect treponema in Trinervitermes geminatus. Our work confirmed the presence of bioactive molecules, including meglutol, in termite fungal mounds. Furthermore, using molecular and electron microscopy approaches, we demonstrated that the phylogenetic diversity of intestinal Treponemes is more significant than previously anticipated. These results contribute to a better understanding of the symbiotic relationship between bacteria and termites and highlight the ecological role of termites.