Ecole Doctorale
Sciences de la Vie et de la Santé
Spécialité
Biologie-Santé - Spécialité Pathologie Vasculaire et Nutrition
Etablissement
Aix-Marseille Université
Mots Clés
Mécanismes,thrombose,neutrophiles,plaquettes,
Keywords
Mechanism,Thrombosis,neutrophils,Platelets,
Titre de thèse
Etude du rôle des neutrophiles et des plaquettes dans la thrombose
Study of the involvment of neutrophils and platelets in thrombosis
Date
Jeudi 21 Mars 2024 à 13:00
Adresse
27 Boulevard Jean Moulin, 13005, Faculté de Pharmacie La Timone Salle de thèse
Jury
Directeur de these |
M. Christophe DUBOIS |
Centre de recherche en cardiovasculaire et nutrition |
Rapporteur |
Mme Chloé JAMES |
INSERM U1034 |
CoDirecteur de these |
Mme Laurence PANICOT-DUBOIS |
INSERM 1263 |
Rapporteur |
Mme Marie-Christine BOUTON |
INSERM U1148 |
Examinateur |
M. Pierre MANGIN |
EFS-Alsace |
Examinateur |
M. Yacine BOULAFTALI |
INSERM U1148 |
Président |
M. Pierre-Emmanuel MORANGE |
INSERM U125 |
Résumé de la thèse
La thrombose est un processus physiopathologique impliquant lendothélium, les plaquettes, les globules rouges et les neutrophiles. Comprendre leurs interactions est donc crucial pour appréhender les pathologies cardiovasculaires. Dans cette étude, nous nous sommes intéressés aux mécanismes de la thrombose.
La première partie de cette thèse examine les mécanismes de la thrombose veineuse profonde (DVT) lors des voyages aériens long courrier. Ces voyages exposent les passagers à des conditions réduites de PO2 et de pression, déclenchant des perturbations, notamment des troubles de la coagulation. Ces pressions partielles équivalentes à des altitudes de 1500-2400 m sont aujourdhui considérées comme le principal facteur de risque du développement des thromboembolismes veineux. Nous avons étudié l'effet des conditions environnementales dun vol longue distance sur le développement de la thrombose veineuse chez des souris exposées à 6h d'hypoxie hypobare ou de normoxie normobare après ligature de la veine cave inferieure (VCI). Notre étude montre que les animaux exposés à une hypoxie hypobare développent un profil pro-thrombotique, avec des thrombi trois fois plus gros et une densité en neutrophiles et en fibrine deux fois plus élevée que les animaux contrôles (normoxie normobare). Cependant, les NETs et les neutrophiles ne semblent pas impliqués dans la thrombose veineuse pendant le vol. L'activation plaquettaire en réponse à l'ADP a été identifiée comme un facteur majeur de la thrombose veineuse associée aux vols long-courrier, suggérant alors de nouvelles cibles thérapeutiques.
La deuxième partie de ce projet vise à identifier la surface impliquée dans l'activation de la coagulation et létat dactivation plaquettaire lors de la formation d'un thrombus avec conservation de lintégrité vasculaire. L'analyse des plaquettes dans un modèle de thrombose au laser identifie trois populations plaquettaires en fonction de leur activation, formant ainsi un gradient dactivation longitudinal et transversal à partir du site de blessure. Bien qu'activées, ces plaquettes ne sont pas pro-coagulantes car la fibrine est principalement retrouvée à la surface de lendothélium (80%). Des phospholipides négatifs au niveau des cellules endothéliales activées après blessure au laser peuvent contribuer à l'assemblage des facteurs de coagulation. Néanmoins, nous ne pouvons pas totalement exclure limplication des neutrophiles dans lactivation de la coagulation lorsque lendothélium est intact. Afin de compléter ces résultats, nous nous sommes donc intéressés au rôle pro-coagulant des neutrophiles. Nous observons alors que la thrombine ninduit pas la formation de NETs et ne semble pas non plus affecter létat dactivation des neutrophiles. Des analyses complémentaires sont nécessaires pour compléter nos résultats et approfondir notre compréhension de linteraction entre la thrombine et les neutrophiles.
Thesis resume
Thrombosis is a pathophysiological process involving the endothelium, platelets, red blood cells and neutrophils. Understanding their interactions is therefore crucial to improve our knowledge of cardiovascular pathologies. In this study, we focused on the mechanisms of thrombosis.
The first part of this thesis investigates the mechanisms of deep vein thrombosis (DVT) during long-distance air travel. Such travel exposes passengers to reduced conditions of PO2 and pressure, leading to disturbances such as coagulation disorders. These partial pressures, equivalent to altitudes of 1500-2400 m, are now considered to be the main risk factor in the development of venous thromboembolisms. We studied the effect of the environmental conditions of a long-distance flight on the development of venous thrombosis in mice exposed to 6 h of hypobaric hypoxia or normobaric normoxia after inferior vena cava (IVC) ligation. Our study demonstrates that animals exposed to hypobaric hypoxia develop a pro-thrombotic profile, with thrombi three times larger and neutrophil and fibrin densities twice as high as in control animals (normobaric normoxia). However, NETs and neutrophils do not appear to be involved in venous thrombosis during flight. Platelet activation in response to ADP has been identified as a major factor in venous thrombosis associated with long-haul flights, suggesting new therapeutic targets.
The second part of this project aims to identify the surface involved in coagulation activation and the state of platelet activation during thrombus formation with the conservation of vascular integrity. Analysis of platelets in a laser thrombosis model reveals three platelet populations according to their activation state, forming a longitudinal and transverse gradient of activation from the site of injury. Although activated, these platelets are not pro-coagulants because fibrin is mainly located at the surface of the endothelium (80%). Negative phospholipids on activated endothelial cells after laser injury may contribute to the assembly of coagulation factors. Nevertheless, we cannot totally exclude the involvement of neutrophils in coagulation activation when the endothelium is intact. To complement these results, we therefore investigated the pro-coagulant function of neutrophils. We found that thrombin does not induce NETs formation, and neither does it appear to affect the activation state of neutrophils. Further analysis is required to complete our results and improve our understanding of the interaction between thrombin and neutrophils.