Soutenance de thèse de Angélina ACIER

L’adénocarcinome pancréatique (ADKP) est l’un des cinq cancers les plus mortels, avec un taux de survie à 5 ans de 8,2% et une médiane de survie de 6 mois. Ce pronostic très sombre est dû à un diagnostic tardif et à une faible efficacité des chimiothérapies. Des travaux antérieurs de l’équipe, portant sur la reprogrammation métabolique de l’ADKP, ont permis de mettre en exergue la forte dépendance de cette tumeur au cholestérol. Cette forte demande est satisfaite par une augmentation de l’internalisation des lipoprotéines riches en cholestérol (LDL) via les récepteurs aux LDL (LDLR). Ces derniers, abondamment présents à la surface des cellules tumorales des ADKP murins et humains, constituent donc une voie d’adressage prometteuse d’agents thérapeutiques et/ou d'imagerie vers la tumeur. Dans cette étude, nous avons généré des cellules tumorales pancréatiques, dérivées des ADKP de souris KIC (LSL-KRasG12D; Ink4a/Arffl/fl; Pdx1-Cre), et dépourvues ou non de Ldlr (cellules PK4A Ldlr-/- et Ldlr+/+). Nous avons utilisé des conjugués fluorescents non-spécifiques ou spécifiques du LDLR (Fc(A680)-VH04sc ou Fc(A680)-VH4127, respectivement). In vitro, nous avons montré que le conjugué Fc(A680)-VH4127 est bien spécifique du LDLR et qu’une fois fixé au récepteur, il va être internalisé et adressé aux lysosomes comme le ligand du LDLR (DiI-LDL). In vivo, dans un modèle de greffes sous-cutanées de PK4A Ldlr+/+ ou Ldlr-/-, nous avons démontré que le conjugué Fc(A680)-VH4127, administré par voie intraveineuse, cible spécifiquement les tumeurs pancréatiques Ldlr+/+ et permet de les discriminer des pancréas sains et des tissus présentant des taux élevés de LDLR (e.g. foie, glandes surrénales). Alors qu’aucune accumulation du conjugué Fc(A680)-VH04sc n’a pu être détectée dans les tumeurs et les organes sains. En utilisant le modèle de souris KIC, reproduisant fidèlement sur le plan histologique (stroma abondant, hypoxie intra-tumorale) les ADKP humains, nous avons montré que le Fc(A680)-VH4127 permet de discriminer les ADKP du pancréas adjacent et des tissus sains. Ce travail suggère que de tels conjugués ciblant le LDLR et radiomarqués pourraient être utilisés en clinique (TEP-scan) afin d’améliorer 1/ le diagnostic de l’ADKP (marges de résection, volume tumoral) et d’augmenter ainsi le nombre de patients susceptibles de bénéficier d’une chirurgie curative et 2/ le suivi de la réponse thérapeutique et la détection des récidives chez les patients opérés.

Pancreatic adenocarcinoma (PDAC) is one of the five deadliest cancers, with a 5-year survival rate of 8.2% and a median survival of 6 months. This poor clinical outcome is due to late diagnosis and low efficacy of chemotherapies. Previous work, aiming to decipher metabolic reprogramming of PDAC, has highlighted its high dependence on cholesterol which tumor satisfies by increasing the internalization of high-cholesterol lipoproteins (LDL) via LDL receptors (LDLR). These receptors, abundantly present on tumor cell surface of murine and human PDAC, constitute a promising route for targeted therapy and/or imaging. In this study, we generated pancreatic tumor cells derived from KIC mice (LSL-KRasG12D; Ink4a/Arffl/fl; Pdx1-Cre), lacking or not Ldlr (Ldlr-/- and Ldlr+/+ PK4A cells). We used fluorescent labelled-vector cargo conjugates targeting LDLR extracellular domain or -scramble conjugates (Fc(A680)-VH4127 and Fc(A680)-VH04sc, respectively). In vitro, we showed that Fc(A680)-VH4127 conjugate specifically targets LDLR and once bind to LDLR, it is internalized and addressed to lysosomes, as the ligand of LDLR (DiI- LDL). In vivo, in subcutaneous Ldlr-/- and Ldlr+/+ PK4A graft models, we demonstrated that Fc(A680)-VH4127 conjugate, intravenously administered, specifically targets Ldlr+/+ pancreatic tumors and not healthy pancreas and tissues with high levels of LDLR (e.g. liver, adrenal glands). In contrast, no accumulation of scramble conjugate could be detected in tumors and healthy organs. Using KIC mice model, faithfully reproducing human PDAC histology (abundant stroma, intratumoral hypoxia), we showed that Fc(A680)-VH4127 conjugate also discriminates tumors from adjacent pancreas and other healthy tissue. This work suggests that such conjugates targeting LDLR and radiolabelled could be used in clinic (PET-scan) to improve 1/ PDAC diagnosis (resection margins, tumor volume) and thus increase the number of patients that could benefit from curative surgery and 2/ therapeutic response monitoring and recurrence detection in operated patients.