Soutenance de thèse de PLOUHINEC Lauriane


Titre de thèse

Rôle des enzymes pectinolytiques fongiques en alimentation animale

On the role of fungal pectin-degrading enzymes in animal feed

Date

27 February 2025 à 14h00

Adresse

Polytech Marseille Bâtiment A 163 avenue de Luminy 13009 Marseille, Amphi A Polytech Marseille

Ecole doctorale

Sciences du Vivant

Specialité

Biologie-Santé - Spécialité Microbiologie

Etablissement

Aix-Marseille Université

Mots clés

CAZymes,Alimentation animale,Champignons,Tourteau de soja,Pectine,Santé intestinale,

Keywords

CAZymes,Animal feed,Fungi,Soybean meal,Pectin,Intestinal health,

Jury

Jury de thèse
Qualité Nom Etablissement
Directeur de recherche M. BERRIN Jean-Guy INRAE UMR 1163 (BBF)
Associate Professor Mme LA ROSA Sabina Leanti Norwegian University of Life Sciences (NMBU)
Senior Scientist M. HOLCK Jesper Technical University of Denmark (DTU)
Directrice de recherche Mme RALET Marie-Christine INRAE de Nantes - UR 1268 (BIA)
Chargée de recherche Mme VOXEUR Aline INRAE de Versailles - Laboratoire IJPB
Maître de conférences M. LAFOND Michael Aix-Marseille Université
Directeur de recherche M. COUTINHO Pedro Maldonado AFMB - CNRS

Résumé de la thèse

Avec une population mondiale qui devrait atteindre 10 milliards d'habitants d'ici 2050, il devient essentiel de trouver des solutions pour assurer une alimentation saine et durable aux humains et aux animaux. Dans ce contexte, les co-produits agricoles, tels que les tourteaux de soja, ont pris une place importante dans l'économie circulaire, notamment par leur valorisation en tant qu'ingrédients destinés aux animaux d'élevage. En raison de leur récalcitrance, l'utilisation des tourteaux de soja en alimentation animale a été rendue possible grâce à l'ajout d'enzymes exogènes, en particulier des « carbohydrate-active enzymes » (CAZymes) fongiques, qui améliorent la digestibilité des tourteaux de soja tout en réduisant la fermentation microbienne indésirable dans l'intestin des animaux. Les travaux de cette thèse ont ainsi porté sur l'étude du potentiel enzymatique des champignons filamenteux pour améliorer la valeur nutritionnelle des tourteaux de soja et atténuer leurs effets néfastes sur la santé intestinale des animaux monogastriques. Une revue critique de la littérature portant sur l'utilisation des CAZymes en alimentation animale introduit le contexte de ce projet de recherche. Sur le plan expérimental, une analyse temporelle de plusieurs sécrétomes fongiques, couplée à une approche matricielle, a révélé l'importance de la dégradation de la pectine des tourteaux de soja pour améliorer leur digestibilité et la disponibilité des nutriments. Cette analyse sécrétomique approfondie a permis d'identifier plusieurs CAZymes fongiques potentiellement impliquées dans la dégradation de la pectine des tourteaux de soja, notamment du rhamnogalacturonane de type I. Ces enzymes ont ensuite été produites en système recombinant, caractérisées et testées sous forme de « mini-cocktails » dans le but d'étudier la synergie enzymatique de déconstruction de la pectine du soja. Au travers de tests fonctionnels et d'une matrice de corrélation de Pearson, dix enzymes ont été identifiées comme prometteuses pour complémenter le Rovabio™ Advance, un cocktail enzymatique commercial destiné à l'alimentation animale. La caractérisation biochimique de ces enzymes, ainsi que l'analyse structurale des fractions pectiques des tourteaux de soja, nous ont permis de proposer un modèle simplifié de la structure de la pectine des tourteaux de soja. Enfin, à l'aide de deux modèles in vitro simulant l'environnement intestinal, nous avons évalué l'impact du traitement enzymatique des tourteaux de soja sur divers marqueurs de santé intestinale. Dans l'ensemble, ce travail propose une approche prometteuse pour le développement et l'évaluation de cocktails enzymatiques destinés à l'alimentation animale. Les résultats de cette étude sont discutés dans un contexte plus large, face aux défis sociétaux, économiques et écologiques associés à l'alimentation humaine et animale.


Thesis resume

With the global population expected to reach 10 billion by 2050, it is essential to find safe and sustainable solutions for feeding both humans and animals. Agricultural co-products like soybean meals have become valuable in the circular economy, especially as components for animal feed. Given their recalcitrance, the implementation of soybean meals in animal diet was made possible by the addition of exogenous enzymes, particularly fungal carbohydrate-active enzymes (CAZymes), which improve diet digestibility while decreasing undesirable microbial fermentation in the gut. This PhD thesis focuses on the enzymatic potential of filamentous fungi to enhance the nutritional value of soybean meals and mitigate their adverse effects on the intestinal health of monogastric animals. A critical review of the literature focusing on the use of CAZymes for animal feed provides the contextual elements of the PhD project. Experimentally, a time-course analysis of fungal secretomes combined with a matrix driven approach demonstrated the importance of breaking down pectic polysaccharides to improve soybean meal digestibility and nutrient release. This detailed secretomic analysis enabled the identification of several fungal CAZymes potentially involved in the degradation of soybean meal pectin, particularly of type I rhamnogalacturonan. These enzymes were produced in a recombinant system, characterized, and tested as enzyme mixes to investigate the enzymatic interplay involved in soybean pectin deconstruction. Through functional assays and a Pearson correlation matrix, ten enzymes were identified as promising to supplement the Rovabio™ Advance, a commercial enzyme cocktail designed for animal feed. Biochemical characterization of these enzymes, along with structural analysis of soybean meal pectic fractions, enabled us to propose a simplified model of soybean meal pectin structure. Finally, using two in vitro models that simulate the gut environment, we evaluated the impact of soybean meal enzymatic treatment on several intestinal health markers. Overall, this work offers a promising approach for the development and evaluation of enzymatic cocktails for animal feed applications. The outcomes of this work are discussed in the broader context of the societal, economic, and ecological challenges involved in feeding the global population.