Soutenance de thèse de Loris VALLIER

Les microvésicules (MV) sont des vésicules extracellulaires submicroniques libérée à la suite du réarrangement des phospholipides membranaires en réponse à un stimulus extérieur ou à l'apoptose. Les MV sont des vecteurs bioactifs dont le rôle dans l'hémostase et la réponse inflammatoire est bien connu à ce jour. La vision initiale attribuant aux MV une activité uniquement procoagulante a été récemment élargie par la démonstration d'une activité fibrinolytique exercée par les MV endothéliales (EMV), tumorales et issues des granulocytes (Gran-MV). Cette thèse comporte deux volets, le premier s’intéresse à un nouveau mécanisme reliant la génération de plasmine des Gran-MV au pronostic des patients. Elle implique le complexe entre l’urokinase (uPA) et son récepteur portée par les Gran-MV jouant un rôle de vecteur d'activité fibrinolytique capable de lyser un thrombus et d’améliorer la survie des souris en état de choc septique (CS). Cette activité thrombolytique s'intègre dans un rôle protecteur des MV capable de contrebalancer le risque de microthrombose systémique associé à la gravité dans le CS. Cette activité fibrinolytique identifie les MV non seulement comme biomarqueurs, mais également en tant que cibles thérapeutiques potentielles. De part cet intérêt croissant comme biomarqueur, un deuxième volet de cette thèse s’est intéressé à la mesure de l’activité procoagulante dépendant du facteur tissulaire sur les MV (MV-FT) qui reste à ce jour un challenge étant donné la multitude de techniques, souvent controversées, qui sont utilisées. Ainsi nous avons proposé une nouvelle stratégie pour mesure l’activité MV-FT utilisant un test fonctionnel présentant une meilleure sensibilité et spécificité que les méthodes existant actuellement. La maîtrise de ces tests fonctionnels d’activité MV-FT et d’activité de génération de plasmine des MV (MV-PGC), utilisant les MV comme biomarqueur dans l’évaluation du statut hémostatique du patient, est une étape essentielle pour accélérer le transfert de ces innovations diagnostiques et thérapeutiques au chevet du patient.

Microvesicles (MV) are submicron extracellular vesicles released following the rearrangement of membrane phospholipids in response to external stimulus or apoptosis. MVs are bioactive vectors whose role in hemostasis and the inflammatory response is well known. The initial vision attributing to MV only procoagulant activity has recently been broadened by the demonstration of fibrinolytic activity exerted by granulocyte (Gran-MV) and endothelial (EMV) derived MV . This thesis has two parts, the first one is interested in a new mechanism linking the generation of plasmin of Gran-MV to the prognosis of the patients. It involves the complex between urokinase (uPA) and its receptor supported by Gran-MV acting as a vector of fibrinolytic activity capable of lysing a thrombus and improving the survival of mice in septic shock (CS) . This thrombolytic activity is part of a protective role for MVs capable of counteracting the risk of systemic microthrombosis associated with gravity in CS. This fibrinolytic activity identifies MV not only as biomarkers, but also as potential therapeutic targets. As a result of this growing interest as a biomarker, a second part of this thesis focused on the measurement of the tissue-factor-dependent procoagulant activity on MV (MV-FT), which remains a challenge to date given the multitude of often controversial techniques that are used. Thus we have proposed a new strategy for measuring the MV-FT activity using a functional test with a better sensitivity and specificity than the existing methods. The mastery of these functional tests of MV-FT activity and MV plasmin generation activity (MV-PGC), using MV as a biomarker in assessing the hemostatic status of the patient, is an essential step to accelerate the transfer of these diagnostic and therapeutic innovations to the bedside.