Soutenance de thèse de CACCAVALE MARIA

Résumé de la thèse

Résumé
Le glioblastome (GBM) est la tumeur cérébrale primitive la plus agressive chez l'adulte, caractérisée par une prolifération rapide, une infiltration diffuse et une résistance aux traitements. De plus en plus de données suggèrent que les cellules souches neurales (NSC) situées dans la zone sous-ventriculaire (SVZ) pourraient constituer les cellules d'origine du glioblastome, en raison de leur capacité d'auto-renouvellement et de leur potentiel prolifératif à long terme. Des études récentes montrent que les NSC humaines de la SVZ peuvent porter des mutations initiatrices à faible fréquence, identiques à celles retrouvées dans la masse tumorale, contribuant ainsi à l'initiation tumorale par expansion clonale et migration. Dans ce contexte, les microARNs (miARNs), régulateurs clés de l'expression génique au niveau post-transcriptionnel, jouent un rôle essentiel à la fois dans la biologie des NSC et dans la gliomagenèse, en influençant la prolifération, la différenciation, la migration et l'apoptose. Bien que de nombreux miARNs individuels soient connus pour être dérégulés dans le GBM, les conséquences globales de la perturbation de la voie des miARNs restent mal comprises. L'objectif de ma thèse de doctorat était d'explorer l'impact de l'inactivation de la voie des miARNs pendant le développement du GBM in vivo. Pour cela, j'ai utilisé un modèle murin génétiquement modifié, développé dans notre laboratoire, permettant l'induction post-natale de GBM à partir des NSC de la SVZ, associée à l'inactivation conditionnelle de Dicer, enzyme essentielle à la biogenèse des miARNs. La clarification du cerveau entier et l'imagerie 3D ont révélé une croissance tumorale altérée en l'absence de Dicer. L'analyse spatiale a mis en évidence deux compartiments distincts : un noyau tumoral dense et des éléments distaux, correspondant à de petits amas cellulaires invasifs détachés de la tumeur principale. Les tumeurs déficientes en Dicer présentaient une réduction du volume du noyau tumoral et une augmentation proportionnelle des éléments distaux, indiquant des dynamiques de croissance et une architecture tumorale modifiées. De plus, elles présentaient une invasivité accrue, avec une dispersion diffuse des cellules tumorales au-delà de la masse principale et un alignement préférentiel le long des vaisseaux sanguins. Pour mieux caractériser ces aspects, j'ai réalisé des analyses en immunofluorescence sur coupes cérébrales. Celles-ci ont confirmé une réduction de la prolifération des cellules tumorales et une large dispersion en dehors de la masse tumorale, avec une localisation périvasculaire significativement enrichie dans les tumeurs déficientes en Dicer. L'analyse phénotypique a révélé que les cellules tumorales exprimaient majoritairement des marqueurs de cellules souches ou progénitrices (SOX2, SOX9, OLIG2), tandis que le marqueur neuronal NEUN était absent de la tumeur et restreint au tissu environnant. Pour compléter ces données in vivo, j'ai établi des cultures primaires à partir des tumeurs. Des tests in vitro ont suggéré un comportement migratoire accru des cellules déficientes en Dicer, en accord avec leur profil invasif observé in vivo. Des analyses transcriptomiques en cours visent à identifier les programmes moléculaires altérés par la perte de miARNs et leur lien avec l'architecture tumorale et l'invasion. En conclusion, cette étude propose un cadre in vivo original pour étudier l'impact de la perturbation globale de la voie des miARNs dans la gliomagenèse, et apporte de nouvelles perspectives sur la régulation de la croissance et du comportement invasif du GBM.