Soutenance de thèse de Anaïs JOACHIM

Etude des syndromes lymphoprolifératifs lymphocytaires T induits par des dysfonctionnements de l’adaptateur moléculaire LAT L’activation des lymphocytes T (LT) résulte de l’intégration de divers signaux émanant du TCR et de molécules de co-signalisation telles que CD28. LAT est une molécule clé de la voie de signalisation du TCR. Chez la souris, une mutation ponctuelle (LatY136F) prévient une signalisation appropriée du TCR et, de manière paradoxale, entraîne un syndrome lymphoprolifératif sévère dépendant de CD28 et impliquant des LT CD4+ effecteurs de type TH2. Mon travail de thèse vise à comprendre comment le dysfonctionnement de LAT perturbe le « cross-talk » entre les voies d’activation du TCR et de CD28, et conduit à un remodelage pathogénique des voies de signalisation. Tout d’abord, nous avons identifié de nouvelles mutations ciblant LAT et ses interacteurs et nous avons montré qu’elles résultent en des syndromes lymphoprolifératifs impliquant non seulement des LT αβ CD4+ mais aussi des LT αβ CD8+ et γδ. Par cytométrie en flux, nous avons montré une hétérogénéité au sein de ces populations et des particularités communes à ces syndromes. Puis, nous avons suivi les étapes précoces conduisant à la mise en place du syndrome LatY136F par cytométrie en flux. Nous avons également utilisé un modèle inductible où l’inactivation de LAT est contrôlée et synchronisée dans tous les LT matures. Ainsi, nous avons établi la trajectoire de différenciation conduisant à l’apparition de différentes sous-populations de LT CD4+ pathogènes. Enfin, nous avons suivi cette trajectoire de différenciation au niveau moléculaire par une approche de séquençage sur cellule unique. Pour conclure, nos travaux montrent que le dysfonctionnement de l’adaptateur moléculaire LAT engendre de manière inattendu des syndromes lymphoprolifératifs se mettant en place précocement et impliquant diverses sous-populations de LT. Ces syndromes constituent un nouvel exemple de conditions où une diminution de la voie de signalisation du TCR résulte en des mécanismes d’autoimmunité.

Study of T cell lymphoproliferative disorders induced by LAT molecular adapter dysfunctions T cell activation results from the integration of diverse signals from the TCR and co-signaling molecules such as CD28. LAT is a key molecule in the TCR signaling pathway. In mice, a point mutation (LatY136F) prevents proper TCR signaling and, paradoxically, leads to a CD28-dependent severe lymphoproliferative syndrome involving CD4+ TH2 cells. My PhD work aims to understand how LAT dysfunction disrupts the cross-talk between TCR and CD28 activation pathways, and leads to pathogenic remodeling of signaling pathways. First, we have identified new mutations targeting LAT and its interactors and shown that they result in lymphoproliferative syndromes involving not only CD4+ but also CD8+ αβ T cells and γδ T cells. By flow cytometry, we have shown heterogeneity in these populations and common features among these syndromes. Then, we followed the early steps leading to the development of the LatY136F syndrome by flow cytometry. We also used an inducible model where the inactivation of LAT is controlled and synchronized in all mature T cells. Thus, we established the differentiation trajectory leading to the emergence of different subpopulations of pathogenic CD4+ T cells. Finally, we followed this differentiation trajectory at the molecular level by a single cell RNA sequencing approach. To conclude, our work shows that the dysfunction of the molecular adaptor LAT unexpectedly leads to early lymphoproliferative syndromes involving various T cells sub-populations. These syndromes are a new example of conditions where a decrease in the TCR signaling pathway results in autoimmune mechanisms.