Soutenance de thèse de DEGEILH Lison


Titre de thèse

Étude de nouvelles enzymes cellulosomales pour la valorisation de la lignocellulose

Study of novel cellulosomal enzymes for lignocellulose valorization

Date

2 décembre 2025 à 14h00

Adresse

Parc scientifique et technologique de Luminy, Polytech Bâtiment A, 163 Av. de Luminy, 13009 Marseille, Amphi A

Ecole doctorale

Sciences du Vivant

Specialité

SCIENCES DU VIVANT Biotechnologie

Etablissement

Aix-Marseille Université

Mots clés

Lignocellulose,Cellulosome,SGNH hydrolases,Cinnamoyl estérase,

Keywords

Lignocellulose,Cellulosome,SGNH hydrolases,Cinnamoyl esterase,

Jury

Jury de thèse
Qualité Nom Etablissement
Directeur de recherche M. RECORD Eric Biodiversité et Biotechnologie Fongiques, Aix-Marseille université
Chargé de recherche M. SCIARA Giuliano Biodiversité et Biotechnologie Fongiques, Aix-Marseille université
Professor M. TOPAKAS Evangelos National Technical University of Athens
Directrice de recherche Mme CZJZEK Mirjam Laboratoire de Biologie Intégrative des Modèles Marins, CNRS - UPMC
Professeure Mme RéMOND Caroline Fractionnement des AgroRessources et Environnement, Université de Reims Champagne-Ardenne

Résumé de la thèse

Les résidus agro-industriels sont des sources durables de biomasse lignocellulosique valorisable dans un contexte de bioéconomie circulaire. Les cultures qui sont à la base de la majorité de ces résidus, telles que les céréales, sont riches en acides hydroxycinnamiques estérifiés aux polymères de la paroi cellulaire végétale. Ces molécules présentent un potentiel en tant que sources renouvelables de composés phénoliques, mais contribuent également à la récalcitrance de la lignocellulose vis-à-vis de sa conversion biotechnologique. Les cinnamoyl estérases hydrolysent les liaisons entre ces molécules et la biomasse et à ce jour appartiennent toutes à la superfamille des α/β hydrolases, tandis que les estérases de la superfamille des SGNH hydrolases sont associées à la désacétylation de la lignocellulose. Cette thèse de doctorat porte sur l'étude de trois nouvelles SGNH hydrolases cellulosomales identifiées dans le transcriptome de Ruminiclostridium cellulolyticum pendant sa croissance sur biomasse lignocellulosique. L'analyse de la séquence de ces enzymes a démontré que deux d'entre elles appartiennent à une nouvelle famille, et présentent une activité cinnamoyl estérase sur substrats modèles et lignocellulosiques, ce qui constitue le premier rapport d'une telle activité au sein de cette superfamille. L'action de ces enzymes en tandem avec des xylanases stimule la libération d'acide hydroxycinnamique et de sucres, suggérant un rôle coopératif favorisant l'hydrolyse de la biomasse in vivo. L'étude structurale d'une de ces enzymes, combinant mutagenèse dirigée et obtention de structures cristallographiques native et en complexe avec un substrat, a fourni des informations sur son mécanisme catalytique et sur les caractéristiques de la poche catalytique qui pourraient définir l'activité cinnamoyl estérase. Dans l'ensemble, ce travail présente un nouvel exemple de diversité fonctionnelle au sein de la superfamille des SGNH, fournissant ainsi de nouveaux outils biotechnologiques pour améliorer l'hydrolyse de la lignocellulose et favoriser la transition vers une bioéconomie circulaire.


Thesis resume

Agro-industrial residues are sustainable sources of lignocellulosic biomass that can be valorized into value-added compounds. The crops producing most of these by-products, such as cereals, are rich in hydroxycinnamic acids esterified to cell wall polymers. While these aromatic molecules hold potential as renewable sources of phenolic compounds, they also contribute to lignocellulose recalcitrance to biotechnological conversion. Cinnamoyl esterases release these molecules from plant biomass and, to date, all of them belong to the α/β hydrolase superfamily, while esterases from the SGNH hydrolase superfamily have been linked to biomass deacetylation. This PhD thesis focuses on the study of three novel cellulosomal SGNH hydrolases identified in the transcriptome of Ruminiclostridium cellulolyticum during growth on lignocellulosic biomass. The analysis of the sequence space of SGNH hydrolases demonstrated that two of these enzymes belong to a new family of enzymes. They both exhibited cinnamoyl esterase activity on model hydroxycinnamate esters and complex lignocellulosic substrates, representing the first report of this activity within the SGNH superfamily. The interplay with xylanases boosted hydroxycinnamic acid release as well as xylanase activity, suggesting a cooperative role promoting biomass hydrolysis in vivo. Structural studies of one of these enzymes, combining mutagenesis with obtention of substrate free and bound crystal structures, provided molecular-level insights into its catalytic mechanism and into features of the catalytic pocket that could drive cinnamoyl esterase activity. Together, the findings of this thesis expand the substrate scope of SGNH hydrolases, showcasing new examples of functional diversity within this superfamily and providing new biotechnological tools to enhance lignocellulose hydrolysis, thereby promoting the transition to a circular bioeconomy.