Soutenance de thèse de MAZENQ Julie

Résumé de la thèse

Introduction L'adénovirus de type 7 (HAdV-7) est une cause majeure d'infections respiratoires sévères chez les jeunes enfants immunocompétents et est fortement associé au développement d'une bronchiolite oblitérante post-infectieuse (BOPI). Les mécanismes conduisant de l'infection aigüe à une pathologie respiratoire chronique restent encore mal compris. Notre objectif était de caractériser l'impact de l'infection à HAdV sur l'épithélium respiratoire et d'étudier les anomalies épithéliales morphologiques et fonctionnelles potentiellement associées à la BOPI.
Méthodes Une analyse morphologique et fonctionnelle ex vivo a été réalisée sur des cellules épithéliales primaires différenciées en interface air-liquide (ALI), obtenues à partir de brossage nasal chez des enfants hospitalisés pour une infection des voies respiratoires bases à HAdV et rhinovirus (HRV), ainsi que sur des biopsies bronchiques au diagnostic de BOPI (NCT06140901). Parallèlement, des cellules épithéliales bronchiques pédiatriques différenciées en ALI, provenant de témoins opérés pour des malformations congénitales des voies aériennes pulmonaires (CERC-SFCTCV-2023-11-21_31945), ont été infectées in vitro par HAdV-7. La réplication virale, la cytotoxicité, l'intégrité épithéliale (TEER), ainsi que les réponses inflammatoires et antivirales ont été évaluées.
Résultats Les cultures ont été établies avec succès pour 27/39 prélèvements positifs pour le HRV, mais aucun des 7 prélèvements positifs pour le HAdV. De même, les cellules bronchiques infectées par le HAdV-7 ne reconstituaient pas de couche épithéliale après réensemencement, contrairement aux cellules infectées par HRV16, suggérant une altération de la régénération épithéliale. In vitro, l'HAdV-7 induisait une désorganisation épithéliale dès J5 et une diminution de la TEER à partir de J7, avec , avec une réplication virale progressive et une cytotoxicité à partir de J7. L'infection entraînait une augmentation de l'interféron (IFN) de types I et III, de l'IP-10 et de la forme longue de la TSLP, tandis que l'IL-33 restait inchangée. Le cidofovir présentait un effet antiviral dose-dépendant. Dans les épithéliums en ALI issus de patients atteints de BOPI (n=3), la composition cellulaire, l'intégrité de la barrière épithéliale ainsi que l'expression des mucines (MUC5AC et MUC5B) étaient comparables à celles des témoins. En revanche, un profil inflammatoire médié par les IFNs étaient observé, avec une augmentation persistante des IFNλ1, IFNλ2-3 et IFNβ, associée à une diminution des transcrits d'IL-33 et de TSLP et de la sécrétion de TSLP. L'IL-8 restait inchangée.

Conclusion L'épithélium respiratoire semble être impliqué tout au long de l'infection, jusqu'au stade de BOPI, avec des anomalies structurelles et fonctionnelles qui évoluent de la phase aiguë vers les séquelles post-infectieuses. Ces résultats suggèrent l'existence de biomarqueurs potentiels ainsi que de nouvelles cibles thérapeutiques.